Estudo fitoquímico do extrato das folhas de Melaleuca leucadendra : obtenção de micelas poliméricas para potencial utilização no tratamento de inflamações oculares.

dc.contributor.advisorSouza, Gustavo Henrique Bianco dept_BR
dc.contributor.advisorSantos, Orlando David Henrique dospt_BR
dc.contributor.authorCarvalho, Karen Vitor
dc.contributor.refereeSouza, Gustavo Henrique Bianco dept_BR
dc.contributor.refereeRuela, André Luís Moraispt_BR
dc.contributor.refereeSoares, Daniel Crístian Ferreirapt_BR
dc.contributor.refereeSoares, Rodrigo Dian de Oliveira Aguiarpt_BR
dc.contributor.refereeVieira Filho, Sidney Augustopt_BR
dc.date.accessioned2022-06-01T20:51:48Z
dc.date.available2022-06-01T20:51:48Z
dc.date.issued2020pt_BR
dc.descriptionPrograma de Pós-Graduação em Biotecnologia. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.pt_BR
dc.description.abstractA inflamação no olho é algo típico de ocorrer em muitas doenças oculares, causando efeitos visuais que vão desde fotossensibilidade e embaçamento até a cegueira. A terapia de escolha atual provoca efeitos colaterais graves em caso de uso crônico e, por via tópica, a presença de muitas camadas a serem permeadas, dificulta alcançar as concentrações terapêuticas no tecido alvo. O extrato etanólico bruto das folhas (EEB) de Melaleuca leucadendra, potente sequestrador de radicais livres, pode apresentar uma boa fonte de compostos com atividade anti-inflamatória. Micelas poliméricas representam uma possibilidade de promover um aumento na permeação ocular de ativos. Assim, o objetivo desse estudo foi desenvolver micelas de poloxâmero 407 contendo fração do extrato das folhas de Melaleuca leucadendra para potencial tratamento de inflamação ocular. Foi obtido o EEB e, por partição líquido/líquido, suas frações hexânica, acetato de etila, butanólica e aquosa. Extrato e frações foram analisados quanto ao teor de compostos fenólicos, teor de flavonoides e atividade antioxidante in vitro. A fração butanólica apresentou uma maior concentração desses compostos e maior atividade (CE50 5,17 ± 0,63), sendo selecionada para as análises posteriores. Foram identificados, por CLUE-DAD-ESI-EM/EM, 8 dos principais flavonoides que a compõem, sendo todos flavonóis derivados da quercetina, canferol e miricetina. A fração apresentou baixa ou nenhuma citotoxicidade nas concentrações de atividade, frente a diferentes linhagens celulares. Apresentou, ainda, potencial efeito antioxidante e anti-inflamatório, in vitro, quando avaliada frente a HaCaT, sendo capaz de, numa concentração de 7,5 μg/mL, reduzir as concentrações de óxido nítrico e EROS e reduzir a expressão de COX-2, analisada por Western Blotting. Pelo método de dispersão a frio, foram preparadas micelas de poloxâmero 407 a 13%, sendo a fração incorporada a elas por dissolução direta. Análises de tamanho de partícula, índice de polidispersão, potencial zeta, pH e comportamento reológico, confirmaram a obtenção de partículas nanométricas, estáveis e com boas propriedades para aplicação ocular. A biocompatibilidade ocular foi avaliada, in vitro, através do teste em membrana corioalantoide de ovo embrionado de galinha (HET-CAM), sendo as formulações classificadas como não irritantes. Assim, essas micelas poliméricas estáveis, com propriedades que podem colaborar para uma elevada biocompatibilidade e possivelmente uma maior biodisponibilidade da fração anti-inflamatória nos tecidos oculares, representam uma boa alternativa para o tratamento oftálmico de uveítes.pt_BR
dc.description.abstractenThe eye inflammation is a typical condition in many eye diseases causing visual effects such as photosensitivity, blurred vision and even blindness. Current therapy causes serious adverse effects during chronic use and, by topical route, the presence of several layers to be permeated represents a challenge to reach therapeutic concentrations on target tissue. The crude ethanolic extract (EEB) of Melaleuca leucadendra leaves is a potent free radical scavenger and may be a promising source of compounds with anti-inflammatory activity. Polymeric micelles represent a possibility to promote an increasing in the eye permeation of active drugs. Thus, the aim of this study was to develop poloxamer 407 micelles loaded with the extract of Melaleuca leucadendra leaves and to evaluate its potential use in eye inflammation. The EEB was obtained and fractionated, by a liquid/liquid partition, in hexanic, ethyl acetate, butanolic and aqueous fractions. Extract and fractions were analyzed as the content of phenolic and flavonoid compounds and in vitro antioxidant activity, for comparison with the EEB. Butanolic fraction presented a higher concentration of these compounds and a higher antioxidant activity (IC50 5,17 ± 0,63) and was selected for subsequent analysis. Butanolic fraction was evaluated by UPLC-DAD-ESI-MS/MS and there were identified eight of the major flavonoids present in its composition, being all of them favonols derived from quercetin, canferol and myricetin. Cytotoxicity of this fraction was assessed against different cell lines, and lower or no-cytotoxicity was reported at activity concentrations. Butanolic fraction also showed remarkable in vitro antioxidant and anti-inflammatory potentials against HaCaT, being able to reduce nitric oxide and EROS at a concentration of 7.5 μg/ml and also decrease COX-2 expression after Western-Blot analysis. By the cold dispersion method, poloxamer 407’s 13 % micelles were prepared, and the fraction was incorporated into them by direct dissolution. Analyzes of particle size, polydispersity index, zeta potential, pH and rheological behavior, confirmed that nanometric stable particles were obtained, with good properties for ocular application. The ocular biocompatibility was evaluated, in vitro, through the Hens Egg Test-Chorion Allantoic Membrane (HET-CAM), and the formulations were classified as non-irritating. These stable polymeric micelles, with properties that can contribute to a high biocompatibility and possibly a greater bioavailability of the anti-inflammatory fraction in ocular tissues, represent a good alternative in the ophthalmic treatment of uveitis.pt_BR
dc.identifier.citationCARVALHO, Karen Vitor. Estudo fitoquímico do extrato das folhas de Melaleuca leucadendra: obtenção de micelas poliméricas para potencial utilização no tratamento de inflamações oculares. 2020. 138 f. Tese (Doutorado em Biotecnologia) - Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2020.pt_BR
dc.identifier.urihttp://www.repositorio.ufop.br/jspui/handle/123456789/14920
dc.language.isopt_BRpt_BR
dc.rightsabertopt_BR
dc.rights.licenseAutorização concedida ao Repositório Institucional da UFOP pelo(a) autor(a) em 07/04/2021 com as seguintes condições: disponível sob Licença Creative Commons 4.0 que permite copiar, distribuir e transmitir o trabalho, desde que sejam citados o autor e o licenciante. Não permite o uso para fins comerciais nem a adaptação.pt_BR
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/us/*
dc.subjectMelaleucapt_BR
dc.subjectUveítept_BR
dc.subjectMicelaspt_BR
dc.subjectAgentes anti-inflamatóriospt_BR
dc.titleEstudo fitoquímico do extrato das folhas de Melaleuca leucadendra : obtenção de micelas poliméricas para potencial utilização no tratamento de inflamações oculares.pt_BR
dc.typeTesept_BR
Arquivos
Pacote Original
Agora exibindo 1 - 1 de 1
Nenhuma Miniatura disponível
Nome:
TESE_EstudoFitoquímicoExtrato.pdf
Tamanho:
2.44 MB
Formato:
Adobe Portable Document Format
Descrição:
Licença do Pacote
Agora exibindo 1 - 1 de 1
Nenhuma Miniatura disponível
Nome:
license.txt
Tamanho:
1.71 KB
Formato:
Item-specific license agreed upon to submission
Descrição: