Desenvolvimento e validação de um método bioanalítico para estudos de farmacocinética e biodistribuição do fármaco anti-chagásico benznidazol em modelo murino.

Abstract

O benznidazol (BNZ) é o único fármaco empregado no tratamento da doença de Chagas no Brasil. Parte da ineficiência do BNZ pode estar relacionada a sua distribuição inadequada entre os tecidos. Portanto, o objetivo deste trabalho foi monitorar e avaliar os perfis farmacocinéticos do BNZ em amostras de plasma e tecidos de camundongos. Para isso foi desenvolvido e validado um método bioanalítico utilizando CLAE-UV destinado a quantificar o BNZ e o padrão interno em matrizes biológicas previamente tratadas pela extração líquido-líquido com acetato de etila e validado de acordo com as especificações da European Medicines Agency – Science Medicines Health (EMEA). O método desenvolvido foi linear na faixa de concentração de 0,1 a 100,0 μg/mL para o baço, cérebro, coração, cólon, duodeno, plasma, pulmão e rim e 0,2 a 100,0 μg/mL para estômago e fígado e demonstrou ser sensível com resultados precisos e exatos. Além disso, constatou-se a estabilidade do BNZ ao ser submetido a diferentes condições de manipulação exigidas pelo método. Para os estudos de farmacocinética e biodistribuição foram utilizados cinquenta camundongos Swiss, fêmeas, com trinta dias de idade, necropsiados nos tempos de 0,16; 0,33; 0,50; 0,75; 1; 2; 3; 4; 5 e 6 hs após a administração, por gavagem, de uma dose única de 100 mg/kg de BNZ, após jejum de doze horas. Os parâmetros farmacocinéticos foram determinados aplicando o modelo monocompartimental. A absorção do BNZ foi relacionada com os dados de área sob a curva (ASC), concentração plasmática máxima (Cmáx) e o tempo para atingir a concentração máxima (tmáx). A distribuição reversível do fármaco da circulação para os tecidos e órgãos foi relacionada ao volume de distribuição (Vd/F). O metabolismo do fármaco foi representado pela meia-vida de eliminação (t1/2β) e sua excreção pelo Clearance (Cl/F). Além disso, foi calculado o tempo médio de residência (TMR). Os parâmetros farmacocinéticos confirmam a rápida absorção do BNZ, quando administrado por via oral e os parâmetros de biodistribuição demonstraram que, em geral, apesar das concentrações nos órgãos terem sido diferentes, a t½β e o TMR foram semelhantes: plasma (Cmáx=41,61μg/mL; tmáx=0,83h; MRT=3,86h; t1/2β=2,03h; Vd/F=38,81mL; Cl/F=13,29mL/h), estômago (Cmáx=127,95 μg/mL; tmáx=0,67h e MRT=2,66h), pulmão (Cmáx=34,58μg/mL; tmáx=0,63h e MRT =2,74h), coração (Cmáx=21,68μg/mL; tmáx=0,67h e MRT =2,42h), cólon (Cmáx=18,11 μg/mL; tmáx=0,67h e MRT =2,03h) baço (Cmáx=27,73μg/mL; tmáx=0,58h e MRT =1,79h), duodeno (Cmáx=8,48μg/mL; tmáx=0,83h e MRT =2,14h), cérebro (Cmáx=12,39 μg/mL; tmáx=0,75h e MRT =2,01h), rim (Cmáx=6,98μg/mL; tmáx=0,49h e MRT =2,00h) e fígado (Cmáx=1,76μg/mL; tmáx=0,75h e MRT 3,41h). A biodistribuição do BNZ ocorre de maneira ampla, atingindo altas concentrações inclusive nos órgãos de maior relevância na infecção pelo Trypanosoma cruzi, coração e cólon.