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Título: Nanobastões de ouro no desenvolvimento de um método de diagnóstico de paracoccidioidomicose.
Autor(es): Dias, Bruna de Paula
Orientador(es): Silva, Breno de Mello
Ferreira, Cyntia Silva
Palavras-chave: Paracoccidioidomicose
Nanotecnologia
Data do documento: 2016
Membros da banca: Lana, Gwenaelle Elza Nathalie Pound
Oliveira, Laser Antônio Machado de
Silva, Breno de Mello
Referência: DIAS, Bruna de Paula. Nanobastões de ouro no desenvolvimento de um método de diagnóstico de paracoccidioidomicose. 2018. 50 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) – Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2016.
Resumo: A paracoccidioidomicose (PCM) é uma micose granulomatosa sistêmica causada por duas espécies de um fungo termodimórfico: Paracoccidioides brasiliensis e Paracoccidioides lutzii. A doença é endêmica na América Latina e apresenta o maior número de casos no Brasil. Embora a maioria das formas clínicas seja assintomática, podem ocorrer infecções severas e progressivas, envolvendo o tecido pulmonar, o sistema nervoso central e pode levar a óbito dependendo da gravidade. Assim, o diagnóstico precoce da doença torna-se essencial para dar início ao tratamento. Apesar disso, ainda não existe um diagnóstico rápido e preciso com custo apropriado para as áreas endêmicas. Nesse sentido, uma alternativa é representada pelo uso de nanobastões de ouro (AuNBs), os quais possuem uma forte absorção característica no espectro visível (ressonância de plasmon) que pode ser monitorada por espectrofotometria. Considerando o uso dos AuNBs como biosensores, os mesmos foram funcionalizados com polietilenoimina e bioconjugados com anticorpos anti-gp43. Tais conjugados foram testados na presença dos alvos purificados e também desafiados com soro de camundongos infectados. A ligação efetiva das biomoléculas em questão foi observada através do deslocamento do pico de absorção plasmônica longitudinal dos AuNBs, sendo satisfatórias quando empregadas as biomoléculas purificadas. Em amostras de soros o sensor não se comportou como esperado. Assim, o deslocamento observado para as biomoléculas purificadas mostram que o sistema deve ser aprimorado para a detecção de antígenos em amostras complexas e pode justificar em parte, o sucesso do sistema de detecção proposto. Além disso, a proposta representa um avanço biotecnológico para o diagnóstico de doenças negligenciadas.
Resumo em outra língua: Paracoccidioidomycosis (PCM) is a systemic granulomatous mycosis caused by two species of a thermodymorphic fungus: Paracoccidioides brasiliensis and Paracoccidioides lutzii. The disease is endemic in Latin America and has the highest number of cases in Brazil. Although most clinical forms are asymptomatic, severe and progressive infections can occur, involving the lung tissue, the central nervous system and can lead to death depending on severity. Thus, early diagnosis of the disease becomes essential to initiate treatment. Despite this, there is not yet a rapid and accurate diagnosis at an appropriate cost for the endemic areas. In this sense, an alternative is represented by the use of gold nanorods (AuNBs), which have a strong characteristic absorption in the visible spectrum (plasmon resonance) that can be monitored by spectrophotometry. Considering the use of AuNBs as biosensors, they were functionalized with polyethyleneimine and bioconjugates with anti-gp43 antibodies. Such conjugates were tested in the presence of the purified targets and also challenged with serum from infected mice. Effective binding of the biomolecules in question was observed by shift the longitudinal plasmonic absorption peak of the AuNBs and being satisfactory when using the purified biomolecules. In serum samples the sensor did not behave as expected. Thus, the observed displacement for the purified biomolecules shows that the system must be improved for the detection of antigens in complex samples and may justify in part the success of the proposed detection system. In addition, the proposal represents a biotechnological advancement for the diagnosis of neglected diseases.
Descrição: Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.
URI: http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/9909
Licença: Autorização concedida ao Repositório Institucional da UFOP pelo(a) autor(a) em 03/05/2017 com as seguintes condições: disponível sob Licença Creative Commons 4.0 que permite copiar, distribuir e transmitir o trabalho, desde que sejam citados o autor e o licenciante. Não permite o uso para fins comerciais nem a adaptação.
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