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Título: Diagnóstico de SARS-CoV-2 : uma revisão sistemática e o desenvolvimento de um biossensor com nanobastões de ouro.
Autor(es): Dias, Bruna de Paula
Orientador(es): Silva, Breno de Mello
Palavras-chave: SARS-CoV-2
Diagnóstico
Nanobastões de ouro
Data do documento: 2022
Membros da banca: Silva, Breno de Mello
Almeida, Isabela Neves de
Figueiredo, Rute Cunha
Rodrigues, Rodrigo Araújo Lima
Ruiz, Alessandra Cristina Gomes
Referência: DIAS, Bruna de Paula. Diagnóstico de SARS-CoV-2: uma revisão sistemática e o desenvolvimento de um biossensor com nanobastões de ouro. 2022. 92 f. Tese (Doutorado em Biotecnologia) - Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2022.
Resumo: Determinadas infecções virais causam morbidade e mortalidade em todo o mundo e alguns surtos atraíram a atenção nos últimos tempos. No contexto da atual pandemia, a realização do diagnóstico rápido e preciso da COVID-19 é uma estratégia eficaz para o controle da doença, permitindo a triagem e garantindo a intervenção terapêutica oportuna. Frente a isso, diversos testes rápidos e a construção de biossensores foram desenvolvidos nos últimos tempos na busca de uma ferramenta de diagnóstico para serem usadas no ponto de atendimento. Nesse contexto, o presente trabalho analisou relatórios científicos sobre testes rápidos para o diagnóstico de COVID-19 para avaliar seus parâmetros de confiabilidade e propôs desenvolver um biossensor com nanobastões de ouro para detecção de SARS-CoV-2. Para isso, termos ou palavras- chave referentes a testes de diagnóstico rápido e testes de ponto atendimento para SARS-CoV-2 e COVID-19 foram pesquisados em dados publicados de novembro de 2020 a novembro de 2021 nos bancos de dados PubMed e Google Scholar. Para o biossensor, a superfície dos nanobastões foi modificada com polietilenoimina e com anticorpos anti-SARS-CoV-2 (0,25 μg/mL) e testados em seguida contra diferentes concentrações do vírus. Nos relatórios científicos, foram observadas diferenças na sensibilidade entre os testes diretos que usaram amostras distintas, e uma boa acurácia em amostras com valores altos de Ct (RT-PCR). Também se observou falta de sensibilidade nos testes para detecção de anticorpos nos primeiros dias após a infecção, com valores crescentes na análise pós-infecção. Reação cruzada com outros patógenos foi relatada. A maioria dos testes analisados em nosso estudo ainda precisam ser aprimorados para testar a reatividade cruzada contra outros patógenos, principalmente contra outros coronavírus. No que se refere ao biossensor, os nanobastões foram sintetizados pelo método de crescimento com sementes usando hidroquinona como agente redutor e mostrou-se reprodutível e estável por um ano quando armazenado em geladeira. O biossensor proposto foi capaz de diferenciar o vírus alvo do controle apenas em concentrações mais altas do vírus (106 UFP/ml). O uso de Triton X-100 não se mostrou eficaz para melhorar a sensibilidade do biossensor, porém em amostras aquecidas os resultados se mostraram melhores quando comparados a amostras não aquecidas. Novos ensaios deverão ser realizados para o aprimoramento do desenvolvimento de um produto que explore adequadamente as propriedades únicas dos nanobastões de ouro.
Resumo em outra língua: Certain viral infections cause morbidity and mortality worldwide, and some outbreaks have attracted attention in recent times. In the context of the current pandemic, carrying out a rapid and accurate diagnosis of COVID-19 is an effective strategy for controlling the disease, allowing for screening and ensuring timely therapeutic intervention. Given this, several rapid tests and the construction of biosensors have been recently developed in the search for a diagnostic tool to be used at the point of care. In this context, the present work analyzed scientific reports on rapid tests for the diagnosis of COVID-19 to assess their reliability parameters and also proposed to develop a biosensor with gold nanorods for the detection of SARS-CoV-2. For this, terms or keywords referring to rapid diagnostic tests and point of care for SARS-CoV-2 and COVID-19 were searched in data published from November 2020 to November 2021 in PubMed and Google Scholar databases. For the biosensor, the surface of the nanorods was modified with polyethyleneimine and anti-SARS-CoV-2 antibodies (0.25 μg/mL) and then tested at different concentrations of the virus. In the scientific reports, differences in sensitivity were observed between the direct tests that used different samples, and good accuracy for the most part. Sensitivity below 80% was found in pediatric samples and samples with high Ct values (RT-PCR). A lack of sensitivity was also observed in the tests for detecting antibodies in the first days after infection, with increasing values in the post- infection analysis. Cross-reaction with other pathogens has been reported. Overall, the tests found in our survey still need to be improved to test for cross-reactivity against other pathogens, especially against other coronaviruses. Regarding the biosensor, the nanorods were synthesized by the seed growth method using hydroquinone as a reducing agent and it was shown to be reproducible and stable for one year when stored in a refrigerator. The proposed biosensor was able to differentiate the target virus from the control only at higher virus dilutions (106 PFU/ml). The use of Triton X-100 was not effective to improve the sensitivity of the biosensor, but in heated samples, the results were better when compared to unheated samples. As for the proposed biosensor, further tests should be carried out to improve the development of a product that adequately explores the unique properties of gold nanorods.
Descrição: Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.
URI: http://www.repositorio.ufop.br/jspui/handle/123456789/15815
Licença: Autorização concedida ao Repositório Institucional da UFOP pelo(a) autor(a) em 25/11/2022 com as seguintes condições: disponível sob Licença Creative Commons 4.0 que permite copiar, distribuir e transmitir o trabalho, desde que sejam citados o autor e o licenciante. Não permite a adaptação.
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