A expressão de RNAm de SmATPDase 1 E SmATPDase 2 em ovos de Schistosoma mansoni modula, via il-10 : o sistema imune de indivíduos infectados.

Abstract

A esquistossomose é uma doença crônica e debilitante que afeta mais de 200 milhões de pessoas em todo o mundo. A formação de granulomas ao redor dos ovos do parasito é mediada por células T CD4 +, e estudos recentes forneceram informações sobre a cascata de citocinas que controla o desenvolvimento da doença. A citocina IL-10 apresenta um papel central na regulação das respostas Th1 e Th2 frente aos antígenos do schistossoma, inibindo a expressão de moléculas co-estimuladoras, contribuindo para o estabelecimento do parasito. As SmATPDases degradam os nucleotídeos extacelulares ATP e ADP em AMP e podem inibir a inflamação mediada por ATP e a trombose mediada por ADP. Hidrólise adicional do AMP gera adenosina, uma molécula com propriedades antiinflamatórias. Essa ação pode modular a resposta imune do hospedeiro e favorecer a sobrevivência do parasito. Neste trabalho, avaliamos a expressão das enzimas SmATPDase 1 e SmATPDase 2 em ovos de S. mansoni obtidos de indivíduos infectados como um possível fator relacionado ao parasito que pode influenciar a resposta imune do hospedeiro e, consequentemente, o desfecho clínico da doença. Amostras de fezes foram coletadas de 39 indivíduos infectados para detectar regiões codificantes das enzimas pela qPCR. A produção de citocinas foi medida em sobrenadantes de culturas de PBMC estimuladas com SEA por ensaio multiplex. A determinação da mediana global de cada citocina foi realizada para caracterização dos indivíduos em altos produtores (AP) de citocinas (indivíduos que apresentaram índices de citocinas acima da mediana global). Observou-se que 6 indivíduos expressaram SmATPDase1 em suas amostras fecais, 6 expressaram SmATPDase2 e 6 expressaram ambas as enzimas. O grupo que expressou apenas a SmATPDase1 apresentou alta frequência de AP para IFN-γ, TNF e IL-4 e baixa frequência de AP para IL-6. O grupo que expressou apenas a SmATPDase2 apresentou alta frequência de AP para IFN-γ, IL-6 e IL-4 e baixa frequência de AP para IL-10. O grupo que expressou ambas enzimas apresentou alta frequência de AP para IL-10 e baixas frequências de AP para IFN-γ, IL-6, IL-2, IL-4 e IL-13. Ao comparar a razão entre IL10/IFN-γ após estímulo com SEA, observou-se que a expressão de ambas as enzimas modula a produção de IFN-γ através da ação da citocina IL-10. Curiosamente, a expressão de SmATPDases contribuiu para a associação positiva entre a intensidade da infecção e o índice de IL-10, uma vez que a correlação positiva entre a intensidade da infecção e os níveis de IL-10 ocorreu apenas no grupo SmATPDase positivo. O gráfico de radar revelou que 62,5% das citocinas analisadas apresentaram frequência reduzida no grupo de indivíduos que expressam ambas enzimas, enquanto a IL-10 manteve uma frequência de altos produtores acima de 50%. Além disso, a análise do diagrama de Venn mostrou que a IL-10 é a única citocina induzida pela expressão de ambas as enzimas ao mesmo tempo. Finalmente, a expressão de SmATPDases em amostras de fezes mostrou-se relevante para o agrupamento de indivíduos junto a dados sociodemográficos, parasitológicos e imunológicos. Assim, a expressão de ambas as enzimas em ovos do parasito parece ser um novo fator, ainda não descrito, capaz de modular negativamente a resposta imune do hospedeiro, através da produção de IL-10 o que pode contribuir para a sobrevivência do parasito.